更新的临床使用hPBMC i金博宝188网址mmuno-oncology建模

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今年2月,我们提出了初始数据Labcorp新兴的人源化小鼠平台利用人类外周血单核细胞(hPBMC)移植。

我们的数据使用NOD.Cg -Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/ SzJ (NSG)鼠标导致识别四个hPBMC捐助者的治疗窗的至少30天hPBMC注入后,一致的T细胞移植,和增长的两个人类异种移植模型,MiaPaCa-2(胰腺)和A549 (NSCLC),这是健壮的hPBMC-engrafted NSG的老鼠。

我们现在初步疗效数据展示使用hPBMC-engrafted NSG老鼠轴承MiaPaCa-2或A549人异种移植后治疗pembrolizumab (Keytruda®, anti-hPD-1)。

实验设计

这些研究的目的是评估抗肿瘤反应pembrolizumab兑MiaPaCa-2或A549人类肿瘤模型移植后hPBMCs NSG的老鼠。动物保健和使用符合执行指南AAALAC-accredited的护理和使用实验动物设施。

NSG老鼠(美国缅因州巴尔港杰克逊实验室、应变# 0005557)是静脉注射hPBMCs从三个不同的正常健康的捐赠者(美国洛杉矶CA Hemacare)一旦肿瘤成为建立(~ 105 - 118毫米³)。pembrolizumab治疗开始后的第二天hPBMC注入。应对pembrolizumab,评估发生移植物抗宿主病(GvHD)同特征测定,和全血收集在两个时间点为人类淋巴细胞标记流式细胞术分析确认捐赠CD45 +细胞移植,包括CD4 +和CD8 + T细胞。

MiaPaCa-2和A549控制肿瘤生长在hPBMC道老鼠

MiaPaCa-2肿瘤倍增时间(Td)在未经处理的控制动物~ 7天,Td在动物管理hPBMCs范围从在每个捐赠者组~ 5到7天。

肿瘤生长均匀意味着肿瘤体积的1000 - 1200毫米³白天36在所有三个捐助者,然而,一些社会团体内部的和组间变异被认为超出了36天。肿瘤生长在1000毫米³似乎并未影响移植的hPBMCs(图1)。

这些结果表明,利用这三个捐助者将适合MiaPaCa-2功效研究时间评估(te)的1000毫米大小³。

图1所示。控制增长MiaPaCa-2皮下肿瘤后hPBMC管理

A549 Td在未经处理的控制动物~ 11天,Td在动物管理hPBMCs范围从9到12天在每个捐赠者组。

肿瘤生长均匀与捐赠者hPBMCs 1和3意味着肿瘤体积的1000 - 1200毫米³通过与一些变化增长超出40天40。

社会团体内部的变化是最明显的在这些老鼠窝藏A549肿瘤和hPBMCs从捐赠者2(图2)。

这些结果表明,捐助者1和3是最适合的A549经颅电刺激效果研究的1000毫米³。

图2。控制增长的皮下后A549肿瘤hPBMC管理

人类淋巴细胞的移植和持久性

移植评估在28天,42天38 (MiaPaCa-2)或(A549)经过immunophenotypic hPBMC管理分析人类免疫细胞标记研究小鼠的外周血。

流式细胞术标记包括mCD45 hCD45 hCD3, hCD4, hCD8。人类CD45 +细胞,活细胞的比例从动物窝藏MiaPaCa-2(图3)或A549肿瘤(图3 b),列在下面,被用来作为一个指示器的hPBMC移植。

我们发现hCD45 +细胞在全血检测所有捐助者在时间点和符合发表文学作品。¹

社会团体内部的变化明显时,移植的平均程度保持一致或增加之间的第一和第二的计算。它出现了hPBMCs移植到动物窝藏A549肿瘤有点高于道到动物窝藏MiaPaCa-2肿瘤,这是符合我们的初始模型发展的数据。

在这个时候,还不知道这是一个正常的结果研究中可变性或是否有模型依赖移植。

图3。hCD45 +细胞移植从NSG小鼠全血中发现管理hPBMCs和窝藏MiaPaCa-2 (A)或A549 (B)异种移植。

图4展示了一个示例分布的CD4 +和CD8 + T细胞在全血和说明了T细胞的分布是一致的时间点之间。

虽然这些数据只代表捐助1小鼠窝藏MiaPaCa-2肿瘤,据报道在捐赠者和类似的数据模型进行测试。

具体来说,CD4 +和CD8 + T细胞的分布范围从42 - 65%和32 - 46%,分别在MiaPaCa-2-bearing老鼠,和51 - 67%和22 - 44%,分别在A549-bearing老鼠(数据未显示)。

出现GvHD症状是由体重监测和临床观察;虽然不是在这些研究病理确诊,这些模型中观察到的症状与疾病有关²和以前的数据(数据没有显示)。

应对Pembrolizumab

有趣的是,在hPBMC-engrafted pembrolizumab治疗小鼠没有影响MiaPaCa-2或A549肿瘤生长与任何捐助者的条件下测试(图5和6)。

这篇文章的时候,有一个关于体内缺乏文学应对pembrolizumab hPBMC-engrafted人源化小鼠窝藏MiaPaCa-2肿瘤。

尽管,我们的数据反映了宽文学关于胰腺肿瘤的耐火性immuno-oncology代理。³响应对A549 pembrolizumab出现温和的报道之前,反应似乎依赖于捐赠。⁴

尽管缺乏一致的反应对A549或MiaPaCa-2 pembrolizumab,这些模型可以证明有用的治疗方法使用rational策略组合与anti-hPD-1有重大改进的余地和评估不同的反应不同。

图5。MiaPaCa-2皮下肿瘤的肿瘤生长与同形像控制或pembrolizumab hPBMC管理和治疗后(anti-hPD-1)

图6。A549皮下肿瘤的肿瘤生长与同形像控制或pembrolizumab hPBMC管理和治疗后(anti-hPD-1)

管理hPBMCs NSG老鼠导致持久的人类T细胞在鼠标MiaPaCa-2或A549肿瘤生长的影响最小。这种方法代表了一个强大的基础平台研究小说的影响人类的代理直接利用人类T淋金博宝188网址巴细胞抗肿瘤活性有直接的临床意义。

未来的工作将演示渗透人类T细胞在肿瘤和外围通过流式细胞术治疗FDA批准对人类肿瘤异种移植免疫治疗与hPBMCs NSG老鼠重组。

Labcorp库存供应这些人PBMC捐助者可供你的研究的需要。请联系我们临床肿瘤学的科学金博宝188网址家看看hPBMC-engrafted NSG老鼠可以用于你的下一个平移immuno-oncology研究。

引用

^2。卡罗琳,新浪Naserian,马修勒克莱尔,艾伦Thiolat Pilon,辛迪Le Bret Yazid Belkacemi, Sebastien Maury弗雷德里克·夏洛特和何塞·l·科恩。简单、可再生的和有效的临床评分系统对急性移植物抗宿主病的小鼠模型。2018。前面。在Immun。(9):10。

^3所示。罗伯特·j·Torphy宇文朱,理查德·d·Schulick。胰腺癌免疫疗法:障碍和突破。2018年。安杂志Surg. 2 (4): 274 - 281。