4T1-luc2:一个支持新的免疫肿瘤药物发现的原位乳腺癌模型

乳腺癌是美国女性中仅次于肺癌的第二大致命恶性肿瘤，预计2016年将有24.6万例新病例和40450例死亡。乳腺癌有许多治疗选择，包括手术、放疗、抗雌激素治疗、靶向治疗(如曲妥珠单抗)和化疗。尽管有这些治疗进展，转移性疾病仍然是一个重要的死亡来源。免疫治疗在过去五年中取得了显著进展，四种T细胞免疫检查点抑制剂获得批准。虽然这些检查点抑制剂都没有被批准用于乳腺癌，但目前有60多个针对PD-1或PD-L1的检查点抑制剂的乳腺癌临床试验正在进行中，还有20多个针对CTLA-4抑制剂的临床试验正在进行中。

因为检查点抑制剂和其他类型的免疫疗法需要完整的免疫系统来激发活性，乳腺癌的同基因小鼠模型是新药物临床前测试的一个重要选择。金博宝188网址Covance充分描述了来自Balb/c小鼠的4T1-luc2乳腺癌模型作为一个原位模型，以支持新型免疫肿瘤制剂的研究。原位4T1-luc2肿瘤转移到淋巴结和肺部，使其成为利用生物发光成像研究原发肿瘤和转移性疾病治疗效果的有价值的模型。4T1-luc2肿瘤在免疫缺陷株和免疫正常Balb/c小鼠中的生长相当，这表明4T1-luc2是一种弱免疫原性肿瘤(图1)。

图1:4T1-luc2在包括同基因Balb/c小鼠在内的多株小鼠体内的原位生长。

PD-1或PD-L1抗体的疗效研究受到4T1肿瘤小鼠致命超敏反应的阻碍。¹可以给两剂没有毒性，但不可能持续给药。相反，我们评估了抗ctla -4联合局部放疗的疗效。使用了仓鼠抗ctla -4抗体，出乎意料的是，仓鼠同型对照在一些小鼠中显示出显著的活性(图2A)，与抗ctla -4活性没有区别(图2B)。局部放疗有疗效(图2C)，但联合放疗和抗ctla -4无明显改善(图2D)。

图2:抗ctla -4联合局部放疗在原位4T1-luc2乳腺肿瘤模型中的疗效。

使用生物发光成像评估转移负担，如图所示为未治疗小鼠转移进展的代表性图像(图3A)。与同型对照治疗小鼠相比，抗ctla -4治疗小鼠的转移瘤负担降低(图3B)。局部放疗也显著降低了转移负担;然而，在联合组中，抗ctla -4单药活性似乎没有改善。

图3:生物发光成像评估转移瘤总负荷随时间的变化:

图3B:转移负担的量化和对治疗的反应。

本研究中使用铅屏蔽对辐射进行局部定位，以减少全身辐射;然而，一些动物仍然表现出辐射毒性的迹象。Covance现在使用Xstrahl公司的小动物辐射研究平台(SARRP)提供聚焦束辐射能力，降低全身辐射毒性。

图4:小鼠同型抗ctla -4抗体治疗ctla -4的疗效。

在4T1-luc2模型中使用仓鼠抗体的非特异性抗肿瘤活性促使后续使用小鼠抗ctla -4抗体进行研究。小鼠抗ctla -4治疗导致4T1-luc2模型的活性极低(图4)，但为客户赞助的与新型免疫肿瘤制剂的研究提供了一个潜在的联合伙伴。此外，我们有广泛的187bet金宝搏4T1-luc2肿瘤的免疫分析，包括CD4 T细胞、CD8 T细胞、调节性T细胞、粒细胞- mdscs、单核细胞- mdscs、M1和m2 -肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的定量(图5)。该模型具有良好的特征，可用于客户资助的新型免疫疗法或可能与市上可用的免疫疗法良好结合的药物的研究。请联系我们了解更多信息，并了解Covance如何帮助你的下一次学习。

图5:4T1-luc2肿瘤的流式细胞术免疫谱图。

¹Mall等，《肿瘤免疫学》(2016)，Vol. 5 (2): e1075114

注:研究是根据适用的动物福利法规在aaalac认证的设施中进行的

参考文献