RM-1:同基因小鼠前列腺癌模型

大多数前列腺癌腺癌由产生精液的腺体细胞发育而来据美国癌症协会估计，2021年美国约有248,530例新病例，导致约34130人死亡。¹每8名男性中就有1人会在一生中被诊断出患有前列腺癌，每41人中就有1人会死于前列腺癌。¹在全球范围内，前列腺癌是男性癌症死亡的第二大原因，仅次于肺癌。¹幸运的是，如果早期发现和治疗前列腺癌，美国患者的五年生存率估计接近100%。²根据肿瘤的分期，治疗方法包括主动监测前列腺切除术、束辐射治疗、近距离放射治疗、激素治疗、化疗和针对IV期癌症骨转移的治疗。为了开发新的治疗方法，无论是单一疗法还是与临床护理标准相结合，在最合适的临床前肿瘤模型中进行测试是关键。金博宝188网址

金博宝188网址密切反映人类疾病的临床前模型对研究发现和药物试验至关重要。少数异种移植模型能很好地应用于该领域，尤其是LNCaP、PC3和DU145在这里看到的．然而，使用异种移植模型的缺点是缺乏完全胜任的免疫系统。另一方面，同基因模型是在完全具有免疫能力的动物中开发的，允许对免疫疗法和组合方法进行测试。在临床前环境中金博宝188网址，经常使用的肿瘤模型是C57BL/6小鼠的RM-1同基因前列腺癌模型。^3.肿瘤细胞系由植入等基因成年雄性小鼠肾包膜下的C57BL/6胚胎的Zipras/myc9逆转录病毒注射细胞发育而来。在下面的例子中，我们将展示RM-1肿瘤的生长特征，它们的免疫特征以及它们对检查点抑制剂和辐射的反应。

在体外，RM-1细胞以成纤维细胞样形态的黏附群体生长。体内，皮下植入5x10⁵6 - 7周龄雄性C57BL/6小鼠腋窝的RM-1细胞形成侵袭性肿瘤，中位倍增时间约为2天。到预期分期的中位时间(100毫米)^3.)为6天，疾病进展时间(2000 mm^3.)平均为12天(图1)。动物的体重在整个期间呈逐渐增加的趋势。

图1。将RM-1细胞皮下植入雄性C57BL/6小鼠腋窝。数据基于9只小鼠/组。雄性C57BL/6小鼠腋窝皮下植入RM-1肿瘤的H&E染色显示细胞活跃分裂(箭头)。

检查点抑制剂的免疫治疗目前正在几个临床前研究和1/2期临床试验中进行评估金博宝188网址⁴用于前列腺癌，其中一些已经显示出令人鼓舞的结果(2期NEPTUNES试验)，使用nivolumab (Opdivo®)和ipilimumab (Yervoy®)联合免疫治疗，分别针对PD-1和CTLA-4通路．⁵同样,n大量的临床前研究金博宝188网址已经在小鼠模型中检验了检查点抑制的效果。为了了解检查点抑制剂对RM-1肿瘤的抗肿瘤效果，研究人员用抗小鼠(m) PD-1、PD-L1和CTLA-4的抗体治疗患有皮下肿瘤的动物。RM-1肿瘤的治疗(分期~ 100mm)^3.)，抗mpd -1、抗mpd - l1或抗mctla -4仅在20-30%的动物子集中产生部分反应(图2)。抗mctla -4治疗导致进展时间增加28%。总的来说，治疗没有导致体重减轻(未显示)。

图2。用同型对照、抗mpd -1、抗mpd - l1或抗mctla -4治疗雄性C57BL/6小鼠后皮下RM-1肿瘤的反应。数据基于9只小鼠/组。

为了更好地了解RM-1肿瘤的免疫特征，收集并分离未经处理的皮下肿瘤。然后用全面的白细胞面板(CompLeukocyte^TM)，并用Attune™NxT流式细胞仪进行分析。使用FlowJo描述免疫亚群。淋巴样细胞浸润，以CD8为代表⁺T细胞和CD4⁺T辅助细胞数量极少，提示免疫系统处于“冷”状态(图3)。髓系细胞占CD45的绝大多数⁺主要由M-MDSCs、G-MDSCs、M1和M2 TAMs构成。综上所述，这些结果表明RM-1肿瘤表现出一种免疫抑制环境，在这种环境中，单一检查点抑制剂治疗无法引起显著的抗肿瘤反应。

图3。免疫细胞亚群在未经治疗的RM-1肿瘤中的分布肿瘤(n=6)长至~ 500mm时采集^3.使用CompLeukocyteä面板进行流式细胞仪分析，以研究髓系和淋巴系特异性细胞群。

放射治疗(RT)，包括外照射或近距离照射(内照射)，用于不同疾病阶段的前列腺癌患者。⁶对于局限性前列腺癌患者，使用这种治疗的5年生存率总体为98.8%。我们检查了皮下RM-1肿瘤对Xstrahl的小动物辐射研究平台(SARRP)提供的单剂量局灶辐射的反应。在所有剂量试验中，单剂量辐射导致进展时间增加:在5、10和20Gy时分别为87%、137%和350%，在20Gy时为11%的无肿瘤幸存者和22%的完全缓解者(图4)。局灶性辐射治疗产生第12天的中位数ΔT/ΔC，值分别为44%、28%和6%，推测缓解者的发生率分别为88.9%(8/9)、77.8%(7/9)和100%(9/9)。较低剂量的放疗可用于评估联合治疗方法，以模拟包括RT在内的临床治疗方案。

图4。C57BL/6雄性小鼠皮下RM-1肿瘤对局灶性辐射的反应。数据基于9只小鼠/组。pbs治疗的对照组小鼠或局灶性放疗(5Gy、10Gy或20Gy)小鼠的单个肿瘤生长只发生一次。

图5总结了生存期作为肿瘤进展随时间变化的函数。RT显示出最佳的反应，35天后约50%的小鼠仍然存活。

总结

新疗法的开发依赖于密切模仿临床疾病的临床前模型。金博宝188网址虽然同基因肿瘤模型不能完全概括患者的疾病，但它们确实比异种移植模型有优势。在本模型聚光灯下，我们回顾了同基因雄性C57BL/6小鼠的RM-1前列腺肿瘤模型。RM-1同基因前列腺模型可作为一种可靠的临床前免疫肿瘤模型，用于研究与放射、检查点抑制剂、共刺激分子和/或标准护理方法的新治金博宝188网址疗组合。

请联系我们实验室的临床前肿瘤学科学家，金博宝188网址以索取完整的数据集或了解更多关于我们的金博宝188网址临床前肿瘤服务以及如何将它们应用到临床前研究中。金博宝188网址

参考文献

¹https://www.cancer.org/cancer/prostate-cancer/about.html

²https://www.cancer.org/cancer/prostate-cancer/detection-diagnosis-staging/survival-rates.html

^3.汤普生，索斯盖特J，基钦纳G，兰德H. ras和myc癌基因在重建器官中诱导的多阶段癌变。细胞1989;56: 917 - 930。

⁴Venkatachalam S, McFarland TR, Agarwal N, SwamiU.前列腺癌中的免疫检查点抑制剂。巨蟹座(巴塞尔)2021;13: 2187。

⁵林奇MD，王燕娜，琼斯RJ，等。Nivolumab (NIVO)和ipilimumab (IPI)治疗具有免疫原性特征的前列腺癌:NEPTUNES多中心、两阶段生物标志物选择II期试验的队列1发表于:AACR 2021年年会;2021年4月10日至15日;虚拟的。抽象LB004。

⁶https://www.cancer.org/cancer/prostate-cancer/treating/radiation-therapy.html